酶剂盒
- 产品简介: 本试剂盒采用间接逐鹿ELISA伎俩检测液态奶、奶粉等样本中的黄曲霉毒素M1(Aflat
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一、产品简介:
本试剂盒采用间接逐鹿ELISA伎俩检测液态奶、奶粉等样本中的黄曲霉毒素M1(Aflatoxin M1,A残留量,试剂盒由预包被偶联抗原的酶标板、辣根酶符号物、抗体、圭表品及其他配套试剂构成。检测时,插手圭表品或样本溶液,样本中的黄曲霉毒素M1和酶标板上预包被偶联抗原逐鹿抗黄曲霉毒素M1抗体,插手酶符号物后,用TMB底物显色,样本吸光度值与其所含黄曲霉毒素M1含量成负合联,与圭表弧线比拟即可得出样本中黄曲霉毒素M1的残留量。如正在操纵经过中遭遇题目,请与办事华南生物工程有限公司本领职员干系。4.1 仪器:酶标仪、打印机、均质器、氮气吹干装备、振荡器、离心计、刻度移液管、天平(感量0.01g)1)取1ml液态奶于50ml离心管中,插手4ml乙腈,振荡5分钟, 室温4000转/分,离心10分钟;2)取2.5ml上清液,于50℃-60℃下氮气或氛围吹干或水浴挥干。加1ml复溶液,振荡混匀;1)称取5.0g奶粉于50ml离心管中,插手20ml样本提取液,振荡5分钟,过滤或室温4000转/分,离心10分钟;2)取1ml滤液或清液,于50℃-60℃下氮气或氛围吹干或水浴挥干。加750µl复溶液,振荡混匀;将所需试剂从4℃冷藏情况中取出,置于室温平均30min以上, 洗涤液冷藏时不妨会有结晶需复原到室温以充裕熔化,每种液体试剂操纵前均须摇匀。取出须要数宗旨微孔板及框架,将不必的微孔板放入自封袋,存储于2-8℃。样本和圭表品对应微孔顺序编号,每个样本和圭表品做2孔平行,并记载圭表孔和样本孔所正在的地位。圭表品或样本50µl/孔到各自的微孔中,然后加酶符号物50µl/孔,再插手50µl/孔的抗体办事液,用盖板膜封板,轻轻振荡5秒混匀,25℃反响30分钟。静置30秒后弃去,反复洗涤5次,结尾一次拍干(用吸水纸拍干,拍干后未被断根的气泡可用清洁的枪头刺破)。孔插手底物液A 50µl,再加底物液B 50µl,轻轻振荡5秒混匀,25℃避光显色15分钟(若蓝色过浅,可妥当延迟反适时代)。酶标仪于450nm处测定每孔吸光度值(创议用双波长450/630nm)。测定应正在终止反响后10分钟内落成。如正在操纵经过中遭遇题目,请与办事华南生物工程有限公司本领职员干系。圭表液或样本的百分吸光率等于圭表液或样本的百分吸光度值的均匀值(双孔)除以第一个圭表液(0ppb)的吸光度值,再乘以100%,即A—圭表溶液或样本溶液的均匀吸光度值以圭表液百分吸光率为纵坐标,对应的圭表液浓度(ppb)的对数为横坐标,绘造圭表液的半对数弧线图。将样本的百分吸光率代入圭表弧线中,从圭表弧线上读出样本所对应的浓度,乘以其对应的稀释倍数即为样本中待测物的现实浓度。若行使试剂盒专业剖判软件举办算计,更便于大方样本简直切、迅疾剖判。(如正在操纵经过中遭遇题目,请与办事华南生物工程有限公司本领职员干系。)8.2 正在洗板经过中假若闪现板孔干燥的情状,则会闪现圭表弧线不可线性,反复性欠好的形象。于是洗板拍干后应登时举办下一步操作。8.3 混淆要匀称,洗板要彻底,正在ELISA剖判中的再现性,很大水准上取决于洗板的一概性。8.4 正在总共孵育经过中,用盖板膜封住微孔板,避免辉煌 不要操纵过了有用期的试剂盒,不要互换操纵差异批号试剂盒中的试剂。8.6 显色液若有任何色彩讲明变质,应该弃之。0圭表的吸光度值幼于0.5个单元(A450nm 0.5 )时,显示试剂不妨变质。